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犬狂犬病毒IgG抗體(RVA-IgG)ELISA試劑盒提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù)，公司將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度，雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期，保質(zhì)保量完成委任實(shí)驗(yàn)，只收取試劑盒的費(fèi)用，其他輔助試劑全部免費(fèi)。產(chǎn)品質(zhì)量，服務(wù)質(zhì)量雙重保障，您盡可放心購(gòu)買、訂購(gòu)！

檢測(cè)原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被狂犬病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中犬狂犬病毒IgG抗體的存在與否。

試劑盒組成及其配置如下：

犬狂犬病毒IgG抗體(RVA-IgG)ELISA試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；

3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

ELISA實(shí)驗(yàn)中一般需要4次加樣，即加標(biāo)本、加檢測(cè)抗體、加底物和加終止液。實(shí)驗(yàn)室使用的微量加樣器應(yīng)注意保樣并定期校正。ELISA比較敏感，每孔加入液體量誤差會(huì)導(dǎo)致最后讀書差別，因此避免儀器帶來(lái)誤差。加樣注意事項(xiàng)：

加樣前：溶液應(yīng)充分混勻。加樣時(shí)避免90度向孔中滴加液體，否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留再吸頭上，從而導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。正確的加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

加樣時(shí)：避免速度過(guò)快，否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性；避免液體濺出；

加樣品時(shí)：?jiǎn)慰子昧恳螅骸?0微升/指標(biāo)，如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100微升/指標(biāo)。

每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。

如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠，不能用槍吸出再加，做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。