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犬免疫缺陷病毒(SIV)ELISA檢測試劑盒實驗前的注意事項:
1. 在實驗開始之前,安排好實驗流程并清潔工作臺。
2. 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色),切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
3. 在混合或溶解蛋白溶液時,避免泡沫產(chǎn)生。
4. 我司僅對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒而造成的樣本消耗負(fù)責(zé)。請使用者在實驗前充分考慮實驗所需的樣本量。
5. 嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行實驗,任何一項步驟缺一不可(均會導(dǎo)致實驗失?。?/p>
檢測原理:試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被免疫缺陷病毒IgG抗體(SIV-IgG)的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中免疫缺陷病毒(SIV)的存在與否。
樣本的準(zhǔn)備和保存:如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
【血清樣本】:用干凈試管收集血液。室溫凝固 30 分鐘,離心 1000×g15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
【血漿樣本】:采用 EDTA 抗凝,抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1000×g15 分鐘。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
【細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液】:離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
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