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科研植物一磷酸鳥苷(GMP)ELISA檢測試劑盒性能:
準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pmol/L。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。
4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
(植物處理方案)
1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨,如無液氮,剪碎,玻璃勻漿器研磨也可;
2、 加入樣品體積9倍(鮮重:勻漿液體積)的提取液(0.1mmol PH7.4 PBS ), 4℃浸提2h;
3、 請于4℃ ,3000rpm,離心10min,收集上清;
4、 取上清檢測。
注:標(biāo)本均應(yīng)密封保存,短期內(nèi)使用(1周左右),可4度保存;若樣本收集與實驗時間相隔較長,務(wù)必保存在-20或-80度,盡量不要超過半年,同時避免反復(fù)凍融。
實驗需要自備物品有:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
科研植物一磷酸鳥苷(GMP)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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