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一. 檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
二. 實驗所需自備試驗器材:
酶標儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
蒸餾水或去離子水
三. 樣本處理及要求:
【血清】:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
【血漿】:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的 30 分鐘內于 2-8℃ 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
【組織勻漿】:用預冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織,剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10分鐘,取上清檢測。
上海軒澤康生物秉承誠信原則:小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡELISA試劑盒實驗全程提供技術指導(從售前的標本收集到實驗結束后的數據分析),試劑盒有任何質量問題上海軒澤康生物包退包換。同時我司承諾凡訂購任意一款ELISA檢測試劑盒,將為您免費代測,為您節(jié)省時間。您只需將標本寄到我司,實驗結果、原始數據、分析數據均可提供。
四. 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡELISA試劑盒組成:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、0.5、1、2、4、8 ng/mL
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
五. 上海軒澤康生物有限公司ELISA檢測試劑盒代測服務內容:
【服務項目】:間接法ELISA檢測、夾心法ELISA檢測、競爭法ELISA檢測。
【內容說明】:客戶提供檢測材料(樣本編號、所測項目、是否做復孔等)。
【檢測周期】:現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中!
【提供以下代測資料給客戶】:檢測樣本原始數據、檢測樣本對應表、標準曲線分析、樣品數據處理、樣本最終結果、提供技術指導。
六. 產品展示:
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