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檢測原理:
科研小鼠N端前腦鈉素ELISA檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被N端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N端前腦鈉素(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
科研小鼠N端前腦鈉素ELISA檢測試劑盒性能:
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1) 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。
2) 混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。
3) 每次孵育時(shí),請(qǐng)使用正確的封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4) 終止液上板書匈奴應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻請(qǐng)充分混合。
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