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ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：1. 請(qǐng)?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液?？蓪?20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液，未用完的放回 4℃3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份 20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水。試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被（ALT）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的（ALT）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒的注意事項(xiàng)：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時(shí)請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過(guò)程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。

4） 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過(guò)程非常重要，洗滌不充分會(huì)下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。