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當(dāng)前位置:> 供求商機> 植物黃酮醇合成酶(FLS)ELISA試劑盒
植物黃酮醇合成酶(FLS)ELISA試劑盒使用注意事項:1. 本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用,溶液應(yīng)輕輕搖勻后使用。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,加熱使結(jié)晶溶解后再配制。2. 底物液使用前建議先行檢查,若溶液顏色發(fā)藍(lán)則已失效,棄去。3. 以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待查樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。4. 板條開封后剩余板條要密封好,保持板條干燥。5. 不同批號的試劑盒組分不能混用。6.正確拿酶標(biāo)板:不要接觸板的底部,否則會影響度數(shù)。
植物黃酮醇合成酶(FLS)ELISA試劑盒操作步驟:
【標(biāo)準(zhǔn)品的加樣】:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
【加樣】:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
【加酶】:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
【溫育】:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
【配液】:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
【顯色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
【終止】:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
【測定】:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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