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上海軒澤康生物人乳頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒:可檢測90個樣本。48T/盒:可檢測42個樣本。ELISA常用的方法有:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等??蓹z測樣本:細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、體液、尿液、血清血漿、腦脊液胸腹水標(biāo)本等。特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。我司致力于為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)可靠的ELISA檢測試劑盒,產(chǎn)品種類包括心肌梗塞檢測ELISA試劑盒、腫瘤標(biāo)志物檢測ELISA試劑盒、胰島素ELISA試劑盒、免疫組化檢測ELISA試劑盒、細(xì)胞凋亡ELISA試劑盒等。
一. 96T試劑盒組成及其配置:
①微孔酶標(biāo)板( 12 孔×8 條);
②陰性對照 0.5mL;
③陽性對照 0.5mL;
④檢測抗體-HRP 10mL;
⑤20×洗滌緩沖液 25mL;
⑥稀釋液 6mL;
⑦底物 A 6mL;
⑧底物 B 6mL;
⑨終止液 6mL;
⑩封板膜 2 張;說明書 1 份;自封袋 1 個.
備注:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
二. 人乳頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒操作步驟:
①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
②設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各 50μL;
③待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加稀釋液 40μL;
④隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
⑤棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
⑦每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。
三. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷:
①試驗(yàn)有效性:陽性對照孔 OD 值平均值≥1.00; 陰性對照孔 OD 值平均值≤0.15。
② 臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
③陰性判斷:樣品 OD 值<臨界值(Cut off),樣品為陰性
④陽性判斷:樣品 OD 值>臨界值(Cut off),樣品為陽性
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