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植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒操作步驟:
【標(biāo)準(zhǔn)品的加樣】:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
【加樣】:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
【加酶】:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
【溫育】:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
【配液】:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干。每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
【顯色】:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
【終止】:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
【測(cè)定】:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒樣本的運(yùn)輸、轉(zhuǎn)存:
1. 新鮮細(xì)胞可用充氮法,2-3天內(nèi)送達(dá);收集的細(xì)胞及裂解細(xì)胞冷凍液氮或干冰運(yùn)輸。
2. 組織樣本收集齊后低溫凍存,將凍存的標(biāo)本放置在裝有5-10公斤干冰的泡沫盒中密封保存運(yùn)輸。(干冰保證-40℃的溫度,避免樣本反復(fù)凍融,5-10公斤的干冰可以保證5-7天的溫度。
3. PCR相關(guān)實(shí)驗(yàn)使用收集細(xì)胞,可直接在細(xì)胞中加TRIzol充分裂解后用冰袋低溫運(yùn)輸
4.細(xì)菌等樣品冰袋低溫運(yùn)輸
5. 客戶所提供的試劑及試劑盒根據(jù)試劑本身保存要求運(yùn)輸.
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