摘要：饑餓素(ghrelin,GHRL)是一種由胃腸道，特別是胃的腸道內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的激素，它能增加食物攝入。饑餓素可能通過增加胃腸蠕動和胃酸分泌來幫助準(zhǔn)備食物的攝入。饑餓素激活垂體前葉和下丘腦弓狀核的細(xì)胞，包括啟動食欲的神經(jīng)肽Y神經(jīng)元。饑餓素刺激具有特定受體的大腦結(jié)構(gòu)--生長激素分泌物受體1A（GHSR-1A）。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被饑餓素（ghrelin）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的饑餓素（ghrelin）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：貝類饑餓素(ghrelin)ELISA試劑盒 科研檢測

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

貝類饑餓素(ghrelin)ELISA試劑盒 科研檢測常見問題解答：

1.     問：試劑盒的加樣量是多少?

上海軒澤康生物解答：加樣量10ul。先加40ul稀釋液，再加10ul樣本。

2.     問：試劑盒的檢測范圍可以調(diào)整嗎?

上海軒澤康生物解答：可以調(diào)整。不同的廠家因?yàn)橛玫臉?biāo)準(zhǔn)品不同，設(shè)定的檢測范圍也有區(qū)別。檢測范圍設(shè)定是根據(jù)樣本不同樣本實(shí)際含量來設(shè)定的，而且這個檢測范圍盡量滿足比較低的狀態(tài)，比如血清血漿，組織勻漿，細(xì)胞樣本等。

3.     問：免費(fèi)代測，寄樣需要注意什么?

上海軒澤康生物解答：凡是購買我司ELISA試劑盒，均可免費(fèi)代測。寄樣要求：樣本分裝在EP管/離心管/凍存管，標(biāo)好編號，干冰+泡沫箱運(yùn)輸，快遞優(yōu)先選擇順豐。

4.     問：樣本需要寄多少?

上海軒澤康生物解答：血清等液相樣本，根據(jù)代測指標(biāo)數(shù)量、是否做重復(fù)檢測而定。比如，測3個指標(biāo)，每個樣本做2次檢測，每個樣本實(shí)驗(yàn)需要60ul。為防止運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)過程中損耗，可以稍微多寄5-10ul。新鮮組織樣本需要郵寄不得少于50mg的量。

5.     問：試劑盒可以分次使用嗎?

上海軒澤康生物解答：我司酶標(biāo)板均可以拆開使用。未用完的試劑、試劑盒，密封保存于2-8℃冷藏。有效期6個月。