上海軒澤康生物有限公司提供售前售后技術(shù)指導(dǎo)，樣本采集、保存、試驗(yàn)操作、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制等相關(guān)的技術(shù)問題都有詳細(xì)的解答，有任何疑問都可與我們溝通，期待與您的合作！

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

操作步驟：

【標(biāo)準(zhǔn)品的加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
【加樣】：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
【加酶】：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

1.  實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。

4.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。

5.  建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

6.  建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本）