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產(chǎn)品名稱：科研植物碳基轉(zhuǎn)移酶(CT)ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：96T（孔）：可以檢測90個樣本、48T（孔）：可以檢測42個樣本

保質(zhì)期：6個月，避光防潮貯存

產(chǎn)品特點：反應(yīng)快、靈敏性高、性能穩(wěn)定

檢測方法：雙抗體一步夾心法

實驗儀器：酶標儀檢測

種屬齊全：魚、植物土壤、大小鼠、牛羊豬、兔猴犬、羊龜?shù)?/p>

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被碳基轉(zhuǎn)移酶（CT）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的碳基轉(zhuǎn)移酶（CT）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測。

4.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒組成及其配置：（檢測范圍請參考說明書）

科研植物碳基轉(zhuǎn)移酶(CT)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

【平衡至室溫】：從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

【加樣】：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

【加酶】：除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

【洗板】：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

【溫育】：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

【顯色、測定】： 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

加樣注意事項：

1.     加樣前：溶液應(yīng)充分混勻。加樣時避免90度向孔中滴加液體，否則會導致液體殘留再吸頭上，從而導致加樣不準確。正確的加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

2.     加樣時：避免速度過快，否則無法保證微量加樣的準確性和均一性；避免液體濺出；

3.     加樣品時：單孔用量要求：≥50微升/指標，如需要做2個復孔則血量≥100微升/指標。

4.     每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個孔顯色時間相同。

5.     如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠，不能用槍吸出再加，做相應(yīng)記錄實驗。

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