人外周血AFPmRNA表達(dá)水平PCR檢測(cè)試劑盒

 用途：科研實(shí)驗(yàn)專用，不得用于臨床診斷，請(qǐng)按說(shuō)明書嚴(yán)格操作

檢測(cè)范圍：PCR檢測(cè)試劑盒

規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)水平。用純化的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1),再與HRP標(biāo)記的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化

成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀

在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)濃度。

需要而未提供的試劑和器材:

37℃恒溫箱。

標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

精密移液器及一次性吸頭

蒸餾水，

一次性試管

吸水紙

相關(guān)圖片(1)

標(biāo)本要求 :

1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控

制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于

標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)

后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)

5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

人外周血AFPmRNA表達(dá)水平PCR檢測(cè)試劑盒
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