目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存Kasumi-1 人紅白血病細胞(STR鑒定)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YLK-XB1492h | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Kasumi1 |
Kasumi-1 人紅白血病細胞(STR鑒定)
細胞特性:
1) 來源:紅白血病細胞,
2) 形態(tài):原粒細胞,懸浮生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運輸和保存:
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的注意事項:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,20%;GlutaMAX-1谷氨/酰胺 1%,Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%,雙抗,1%。
注意事項:
a) 該細胞復蘇后成活率較低,會出現(xiàn)大量死細胞和死細胞碎片,培養(yǎng)兩周后有所好轉(zhuǎn)。建議每1-2周對細胞進行1000rpm, 5mins離心,棄掉上清,加入新鮮wan全培養(yǎng)液,可以去掉部分細胞碎片和顆粒。培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)死細胞和細胞碎片,收到郵寄的活細胞的用戶若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物內(nèi)有部分死細胞和細胞碎片,此為正?,F(xiàn)象。
b) 細胞培養(yǎng)過程中會有輕微聚團,輕輕吹打開即可。當細胞密度較大或者培養(yǎng)液變黃時,需要及時進行半換液或者wan全換液。
c) 該細胞對血清質(zhì)量較為敏感,我?guī)旖ㄗh您使用進口da品牌優(yōu)質(zhì)血清進行培養(yǎng)。
d) 請注意保持細胞密度在合適的范圍(3x105 ~ 3x10^6 /ml),不能過稀。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
Kasumi-1 人紅白血病細胞(STR鑒定)
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