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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)

RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)
  • RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-12 20:58:23瀏覽次數(shù):219評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 YLK-XB1385h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 RwPE-2
RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)該細胞來源于54歲白人男性。源于正常成人前列腺周邊組織的上皮細胞經(jīng)過轉染HPV-18后建系得到該細胞株。在三維基質膠培養(yǎng)時在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA(kallikrein 3, KLK3)。來源于RWPE-1的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細胞株和 RWPE2-W99

RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)


細胞特性:

1) 來源:前列腺正常細胞

2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106  細胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。


運輸和保存:

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


細胞接收后的注意事項:

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。


培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備 角質細胞無血清培養(yǎng)基添加對應因子按照收到的生長因子對應規(guī)格:1mL加0.2%, 5mL 加1%,同時添加1% P/S 來培養(yǎng)細胞?;蛘?nbsp;準備Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019) 來培養(yǎng)細胞。

備注:

1、Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培養(yǎng)液包含兩個組份:基礎培養(yǎng)基1瓶500mL+生長因子1管1mL .

2、注意不要過濾完培.

3、由于角質細胞無血清培養(yǎng)基或者Defined K-SFM為無血清培養(yǎng)液無法終止胰/酶消化,所以消化完成后要通過添加2%FBS(用D-PBS稀釋)終止消化并離心去除胰/酶,再進行后續(xù)操作。無血清完培養(yǎng)液建議添加抗生素一起培養(yǎng)。

4、該細胞貼壁性弱,建議使用Corning的cellbind細胞培養(yǎng)瓶 進行細胞培養(yǎng)

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。細胞消化時間3-4min。傳代比例1:2,傳代周期2-3天.

3)凍存液:完培養(yǎng)液92%,DMSO 8%,現(xiàn)用現(xiàn)配。


細胞處理:

1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。


RwPE-2 人前列腺正常細胞(STR鑒定)

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