目錄:優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復(fù)蘇/凍存LIM1215人結(jié)直腸癌細胞
| CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 貨號 | YLK-XB0421h | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 |
LIM1215人結(jié)直腸癌細胞
簡稱：LIM1215
中文名：人結(jié)直腸癌細胞
別名：LIM1215細胞，人結(jié)直腸癌細胞
種屬：人
來源：結(jié)直腸癌；男性
培養(yǎng)條件：1640
培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%； 二氧化碳 (CO2)，5%
狀態(tài)：貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細胞培養(yǎng)操作步驟：
1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；
2. 吸干凈PBS后
加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導(dǎo)致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；
4. 將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
注意事項：不同品牌胰-酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
凍存方法：
1.消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存。
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