SGC-7901-LUC細(xì)胞
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;專用防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:2-3周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)聯(lián)系銷售人員,我們將盡快為您解決
SGC-7901-LUC?細(xì)胞
1,簽收細(xì)胞后狀態(tài)穩(wěn)定可以先凍存留種
2,傳代當(dāng)天用普通培養(yǎng)基,不要加嘌呤霉素,待細(xì)胞培養(yǎng)1-2天,密度達(dá)到40%后再加
3,階梯式加藥:待到細(xì)胞密度40%以上后,初次加1ug/ml維持觀察2天左右,細(xì)胞狀態(tài)無影響再加到1.5-2ug/ml,觀察2天無影響后,最后加到3ug/ml
4,復(fù)蘇后,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定,密度40%以后,直接加3ug/ml,梯度加藥主要是針對第一次使用嘌呤霉素的時(shí)候,以免不同實(shí)驗(yàn)室的藥物濃度和活性差異較大,第一次直接使用高濃度把細(xì)胞狀態(tài)弄受損
5,凍存后復(fù)蘇初期,可以用15%血清,讓狀態(tài)盡快穩(wěn)定,然后再降為10%
GFP 和 RFP 分別轉(zhuǎn)染的綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白 直接在熒光顯微鏡下 即可觀察
LUC是螢火蟲熒光素酶 需要加底物(D-熒光素鈉鹽)發(fā)光 激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nM
支原體污染會對細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?
支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長參數(shù), 代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義。
CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?
定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。
為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 顏色會偏暗紅色, 且pH值會越來越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí), 可以通入無菌過濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。