Renca-LUC???細胞
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;專用防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:2-3周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時聯(lián)系銷售人員,我們將盡快為您解決
Renca-LUC?細胞
1,簽收細胞后狀態(tài)穩(wěn)定可以先凍存留種
2,傳代當天用普通培養(yǎng)基,不要加嘌呤霉素,待細胞培養(yǎng)1-2天,密度達到40%后再加
3,階梯式加藥:待到細胞密度40%以上后,初次加1ug/ml維持觀察2天左右,細胞狀態(tài)無影響再加到1.5-2ug/ml,觀察2天無影響后,最后加到3ug/ml
4,復蘇后,待細胞狀態(tài)穩(wěn)定,密度40%以后,直接加3ug/ml,梯度加藥主要是針對第一次使用嘌呤霉素的時候,以免不同實驗室的藥物濃度和活性差異較大,第一次直接使用高濃度把細胞狀態(tài)弄受損
5,凍存后復蘇初期,可以用15%血清,讓狀態(tài)盡快穩(wěn)定,然后再降為10%
GFP 和 RFP 分別轉(zhuǎn)染的綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白 直接在熒光顯微鏡下 即可觀察
LUC是螢火蟲熒光素酶 需要加底物(D-熒光素鈉鹽)發(fā)光 激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nM
書上說,Hank‘s 平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用,不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么?Hank’s 平衡鹽溶液(HBS)和Earle‘s平衡鹽溶液(EBS)有什么本質(zhì)的功能差別?
HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中,溶液會變堿,Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagles液。如果僅僅是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks液就可以了。
各種細胞培養(yǎng)用的dish,flask是否均相同?
不同廠牌的dish 或flask, 其所coating 的polymer 不同, 制造程序亦不同, 雖對大部分細胞沒有太大之影響, 惟少數(shù)細胞則可能因使用廠牌不同之dish 或flask 而有顯著之生長差異。
購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形? 購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?