化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
給你說說白色念珠菌生化鑒定試劑盒的操作步驟
閱讀：2336 發(fā)布時(shí)間：2020-12-7 白色念珠菌生化鑒定試劑盒適用于檢測(cè)人類動(dòng)植物組織勻漿，細(xì)胞上清液，血清，血漿，尿液或其他相關(guān)生物液體的濃度。
兩抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）用于白色念珠菌生化鑒定試劑盒生化鑒定。將樣品，標(biāo)準(zhǔn)樣品和HRP標(biāo)記的抗體添加到預(yù)包被的孔中，然后孵育并*清洗。TMB用作顯色的底物。TMB在過氧化物酶的催化作用下轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色，在酸的作用下終轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。顏色深度與樣品中的顏色之間存在正相關(guān)。用酶標(biāo)記儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度（OD值），并計(jì)算樣品濃度。
白色念珠菌生化鑒定試劑盒的操作步驟：
1、室溫平衡20分鐘后，從鋁箔袋中取出所需的膠條，然后用自密封袋將剩余的膠條放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品孔和樣品孔，并向標(biāo)準(zhǔn)樣品孔中加入不同濃度的50μl標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
3、在樣品孔中，加入10μl待測(cè)樣品，然后加入40μl樣品稀釋液；未添加空白孔。
4、除了空白孔，將100μlHRP標(biāo)記的抗體添加到標(biāo)準(zhǔn)樣品孔和樣品孔的每個(gè)孔中。用封口膜將反應(yīng)孔密封，并在37℃水浴或恒溫箱中孵育60分鐘。
5、丟棄液體，在吸水紙上拍干，在每個(gè)孔中充滿洗滌液，靜置1分鐘，甩掉洗滌液，在吸水紙上拍干，并以此方式洗板5次（也使用洗衣機(jī)清洗木板）。
6、向每個(gè)孔中加入50μl底物a和50μLB，并在37℃下孵育15分鐘。
7、向每個(gè)孔中添加50μl終止溶液，并在15分鐘內(nèi)確定450nm處每個(gè)孔的OD值。