化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X7054 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞外周血單核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周?chē)M織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線(xiàn)粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱(chēng)為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。在炎癥周?chē)鷨魏思?xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠前列腺特異性抗原試劑盒 小鼠前列腺特異性抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠前列腺特異性抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前列腺特異性抗原試劑盒、小鼠前列腺特異性抗原試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠前列腺素試劑盒 小鼠前列腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠前列腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前列腺素試劑盒、小鼠前列腺素試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽試劑盒 小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽試劑盒、小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒 小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒、小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)導(dǎo)向因子(Slit2) ELISA 試劑盒 96T/48T
Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒
HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 人N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯(AcSDKP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GoatBeta-Endorphin,β-EP試劑盒山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母黑色素含量比色法定量試劑盒20次
MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
RPS27A抗體
鉀離子通道Kir2.2抗體
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein
氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白 Recombinant Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)
MAP1LC3A重組人 LC3A / MAP1LC3A 蛋白 Protein
COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽)
MS4A1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽)
氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白 Recombinant Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)
COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽)
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein
MS4A1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽)
MAP1LC3A重組人 LC3A / MAP1LC3A 蛋白 Protein
雞外周血單核細(xì)胞大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒 ，英文名： C3a ELISA Kit
Mouse Toll like receptor 9 (TLR-9/CD289) ELISA Kit 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒
ELISA 小鼠表皮生長(zhǎng)因子(mouse EGF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLAM(HumanLipoarabinomannan)ELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖
通用型艾里塔拉軍團(tuán)菌(Legionellaerythra)試劑盒20次
ELISAKitVtg蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原
化工儀器網(wǎng)