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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
滑膜 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8280 |
細胞簡介：
雞滑膜分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構，各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎（OA）以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節(jié)的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體，是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成?；ぜ毎饕δ埽孩倩ぜ毎a生潤滑液成分，并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
方法簡介：
實驗室分離的雞滑膜采用混合酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的雞滑膜經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
雞滑膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
總抗氧化能力（T-AOC）試劑盒（比色法）
過氧化物酶（GSH-PX）測定試劑盒（比色法）
二（MDA）測定試劑盒（TBA法）
脂肪酶（LPS）測定試劑盒（比色法）
豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA 試劑盒
Human receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) ELISA Kit 人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒
Rabbitoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforapo-B100(MouseapoproteinB100)ELISAKit小鼠載脂蛋白B100
血濾紙片樣品半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量試劑盒20次
Porcinelowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit豬低分子肝素(LMWH)試劑盒
FAM55D蛋白抗體
人肌紅蛋白抗體
IL21R重組食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標簽) Protein
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase 0.5mgICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)
IL17F重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 (His 標簽) Protein
C10ORF54 Protein Human 重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 (His 標簽)
PRDX1 Protein Mouse 重組小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 (His 標簽)
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase 0.5mgICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)
C10ORF54 Protein Human 重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 (His 標簽)
IL21R重組食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標簽) Protein
PRDX1 Protein Mouse 重組小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 (His 標簽)
IL17F重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 (His 標簽) Protein
雞滑膜細胞大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒 ，英文名： IL-1sRⅠ ELISA Kit
Rabbit high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-9(mouse IL-9) 進口分裝
CLIAKitforIL-4(HumanIerleukin4)ELISAKIT人白介素4
通用型雞傳染性喉氣管(ILT)試劑盒20次
ELISAKitIGF-2大鼠胰島素樣生長因子2
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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