詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7028 |
細胞簡介:
雞外周血淋巴分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血,它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細胞或未被釋放入循環(huán)的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,主要是血液循環(huán)中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%~80%)和B細胞(占20%~30%)。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的雞外周血淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔白細胞介素15試劑盒 兔白細胞介素15試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白細胞介素15試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細胞介素15試劑盒、兔白細胞介素15試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔白介素17試劑盒 兔白介素17試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白介素17試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔白介素17試劑盒、兔白介素17 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒、兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔6前列腺素F1a試劑盒 兔6前列腺素F1a試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔6前列腺素F1a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔6前列腺素F1a試劑盒、兔6前列腺素F1a 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasic carcinoma marker ELISA Kit 人胃癌標志物試劑盒
HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 人高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanComplemefragme4a,C4a試劑盒人過敏毒素/補體片斷4(C4a)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK1/CYCLINB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
S100鈣結(jié)合蛋白A8抗體
鉀通道相互作用蛋白3抗體
AHSG重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 Protein
上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)重組蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)
IL31重組人 IL-31 / IL31 蛋白 Protein
ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)重組蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)
ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白
AHSG重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
IL31重組人 IL-31 / IL31 蛋白 Protein
雞外周血淋巴細胞大鼠補體蛋白4(C4)試劑盒 ,英文名: C4 ELISA Kit
Mouse alpha 1 acid glycoprotein (1-AGP) ELISA Kit 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒
ELISA 小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1) 進口分裝
CLIAKitforKP(Humankaliureticpeptide)ELISAKit人利尿肽
通用型半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitt-PA大鼠組織型纖溶酶原激活劑
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行