詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7039 |
細胞簡介:
雞小腸黏膜上皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔補體蛋白3試劑盒 兔補體蛋白3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔補體蛋白3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔補體蛋白3試劑盒、兔補體蛋白3 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒、兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔白細胞介素35試劑盒 兔白細胞介素35試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白細胞介素35試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細胞介素35試劑盒、兔白細胞介素35 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔白細胞介素1試劑盒 兔白細胞介素1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白細胞介素1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細胞介素1試劑盒、兔白細胞介素1試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠apelin 12(AP12)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 大鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
HumanParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancomplemeconolprotein,CCP試劑盒人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織B-RAF激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SC35蛋白抗體
減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體
CPE重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標簽) Protein
內(nèi)皮素1(EDN1)重組蛋白 Recombinant Endothelin 1 (EDN1)
CCL18重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 Protein
HYOU1 Protein Human 重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP
內(nèi)皮素1(EDN1)重組蛋白 Recombinant Endothelin 1 (EDN1)
HYOU1 Protein Human 重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白
CPE重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP
CCL18重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 Protein
雞小腸黏膜上皮細胞大鼠補體蛋白3(C3)試劑盒 ,英文名: C3 ELISA Kit
Mouse alpha 1 microglobulin (alpha 1-MG) ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒
ELISA 小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin) 進口分裝
CLIAKitforKLR(Humankillercelllectin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細胞凝集素樣受體
通用型半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitTPA大鼠組織多肽抗原
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行