Hoechst染色:hoechst可以穿過(guò)活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合(主要為凋亡活細(xì)胞)在紫外光下將核染為藍(lán)色.Hoechst染細(xì)胞核會(huì)影響共聚焦顯微鏡對(duì)該樣本其他熒光的觀察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258兩種hoechsts33258， hoechst33342二者區(qū)別不大，但是hoechst33342對(duì)細(xì)胞的毒性作用更小一些，所以-般來(lái)說(shuō)hoechsts33258用于細(xì)胞固定后再染色，而hoechst33342則可以對(duì)活細(xì)胞直接進(jìn)行染色!
PI (Propidium Iodide 碘化丙啶)染色:是一種可對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè).碘化丙啶(Propidium Iodide, PD是- -種核酸染料(紅色)，它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜，但調(diào)亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性的增加，PI能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅.用PI單一染色觀測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞, 只能表示細(xì)胞的壞死情況，而不是凋亡( 當(dāng)然晚期凋亡PI亦可著色)。但是如果您只是想知道細(xì)胞的死亡情況，而不是仔細(xì)區(qū)分壞死或凋亡，那么PI單一染色也可以。但是如果您一定要認(rèn)定細(xì)胞的調(diào)亡，那么PI單一染色顯然不夠!
annexin-V染色細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜標(biāo)志發(fā)生改變其中,磷脂酰絲氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的條件下與其高親和力特異性結(jié)合.這樣,Annexin-v染色陽(yáng)性,表示細(xì)胞處于早期凋亡狀態(tài).Annexin-V結(jié)合不同的熒光抗體,就可以利用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡以及共聚焦激光掃描顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。Annexin V用FITC標(biāo)記發(fā)綠色熒光;如果用PE標(biāo)記就發(fā)紅色熒光。