TUNEL 法的實(shí)驗(yàn)原理
基本原理：對(duì)不同組織切片先增加細(xì)胞膜通透性，然后讓 rTDT 和生物標(biāo)記的 dTUTP 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在 rTDT 的輔助下 dTUTP 與核斷裂的 DNA 3』-OH 結(jié)合，再用 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素與 dTUTP 上的 biotin 結(jié)合（每個(gè)鏈霉親和素至少可以再結(jié)合 3 個(gè) biotin 分子），后用 DAB、過氧化氫與 SP 上的辣根過氧化物酶 HRP 發(fā)生氧化、環(huán)化反應(yīng)，形成苯乙肼聚合物而呈現(xiàn)棕褐色，終通過計(jì)數(shù)每張切片上不同視野中 TUNEL 陽性細(xì)胞的比例來判斷細(xì)胞凋亡發(fā)生情況。
冰凍切片：取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中，用干冰運(yùn)輸，固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存，并盡快用于檢測(cè)；