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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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Edu細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2024-10-18 16:02:49瀏覽次數(shù):1255次

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Edu細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)EdU可以在DNA復(fù)制的時(shí)候摻入到新合成的DNA鏈中,通過- -個(gè)*Click 反應(yīng)把熒光基團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣我們就能通過檢測熒光而知道細(xì)胞的增殖情況了。

Edu細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)

Edu細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)操作步驟

1.細(xì)胞培養(yǎng):取對(duì)數(shù)生*細(xì)胞,以每孔4x103~1x 105細(xì)胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常生長階段

2.藥物處理:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行各種藥物處理

3. EdU標(biāo)記:用細(xì)胞培養(yǎng)基按1000: 1的比例稀釋EdU溶液(試劑A),制備適童50μM EdU培養(yǎng)基; .

注: 1)EdU濃度與孵育時(shí)間相關(guān),短時(shí)間孵育(<2h宜采用高濃度(10~50 μM);長時(shí)間孵育(= 24h)宜采用低濃度(1~10μM);

a.如果需配置10μM EdU培養(yǎng)基,需調(diào)整為5000: 1稀釋比例

b.配置好的培養(yǎng)基的保存時(shí)間取決于培養(yǎng)基的性質(zhì)。

4.細(xì)胞固定

5. Apollo染色

6.圖像獲取及分析

客戶提供

1.提供新鮮的肝素或者EDTA抗凝的外周血

2.提供新鮮的培養(yǎng)細(xì)胞,提供新鮮組織,需要實(shí)驗(yàn)室制備成單細(xì)胞懸液。我們提供

完整項(xiàng)目報(bào)告



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