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當(dāng)前位置:蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司>>技術(shù)文章>>一抗和二抗有什么區(qū)別?
文章標(biāo)簽: 抗體 抗原抗體反應(yīng) 一抗二抗 科學(xué) 科普
抗體有一抗和二抗的區(qū)別,抗體也稱免疫球蛋白是免疫系統(tǒng)響應(yīng)“外來"物質(zhì)(即微生物上存在的抗原)而產(chǎn)生的糖蛋白。每種抗體都是不相同的,它們會與其同源抗原結(jié)合并中和感染過程中微生物產(chǎn)生的毒素??贵w存在于血漿、血清、唾液和眼淚等體液中。事實(shí)上,它們約占血漿中蛋白質(zhì)的 20%。
抗體結(jié)構(gòu)
抗體屬于 Y 形分子,它的結(jié)構(gòu)主要是由3個部分所組成的。
它們總共有4條鏈:即兩條輕鏈與兩條重鏈。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合允許抗體分子同時與多個細(xì)胞結(jié)合??贵w分子的不同部分可以結(jié)合多種抗原,也可以結(jié)合一些效應(yīng)分子。
抗體的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個臂,該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相比之下,Y 結(jié)構(gòu)的莖被稱為恒定區(qū)或 C 區(qū),它只能與有限數(shù)量的效應(yīng)細(xì)胞和分子結(jié)合。
一抗和二抗
經(jīng)常產(chǎn)生抗體用于研究。它們根據(jù)其結(jié)合能力和用途分為初級和次級。
可以與特定蛋白質(zhì)或感興趣的生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等動物為宿主,以單克隆 (mAb) 或多克隆抗體 (pAb) 的形式生產(chǎn)一抗。
MAb 或 pAb 各有優(yōu)缺點(diǎn),在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)缺點(diǎn)。
MAb 由動物的單個 B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生,因此僅針對抗原的一個表位。
PAb 由動物的多個 B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生,并且具有針對抗原的幾個表位的抗體的異質(zhì)混合物。
MAb 非常適合相同的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn),并且產(chǎn)生的背景染色最少或不產(chǎn)生背景染色。在使用 mAb 時,與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性也降低了。
由于 pAb 可以結(jié)合單一抗原的多個表位,因此它們能夠識別抗原中的微小變化。它們還產(chǎn)生更強(qiáng)的抗原檢測信號。因 此,它們非常適合涉及變性蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。
一抗和二抗的應(yīng)用
一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標(biāo)志物。
二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。
二抗在標(biāo)記和檢測方面比較靈敏和靈活——所以,它們在流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中用于一抗的比色、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測。
二抗類型的選擇基于一抗的類別:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標(biāo)簽類型和來源宿主。
由于大多數(shù)一抗是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的,并且大多數(shù)一抗屬于 IgG 類,因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。
常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應(yīng)始終能夠識別產(chǎn)生一抗的宿主物種,例如,為了檢測從小鼠產(chǎn)生的一抗,使用抗小鼠二抗。
在 ELISA 和蛋白質(zhì)印跡中,標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中,僅使用熒光標(biāo)記。
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