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[供應(yīng)]免疫熒光

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更新時(shí)間：2024-11-24 21:00:06

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免疫熒光（Immunofluorescence）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。
 　　免疫熒光（Immunofluorescence）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。
　　免疫熒光原理
　　免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性，所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí)，只要知道其中的一個(gè)因素，就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體（或抗原）上，與其相應(yīng)的抗原（或抗體）結(jié)合后，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
　　免疫熒光主要步驟：
　　石蠟切片復(fù)水，或是冰凍切片；
　　抗原修復(fù)（需要時(shí)）；
　　抗體封閉液封閉；
　　一抗反應(yīng)4度，6小時(shí)；
　　PBS洗滌3次；
　　熒光標(biāo)志的二抗，37度，30分鐘；
　　PBS洗滌3次；
　　抗熒光衰減封片劑封片。
　　免疫熒光主要特點(diǎn)
　　優(yōu)點(diǎn)：
　　特異性強(qiáng)；
　　敏感性高；
　　可進(jìn)行多色熒光共同染色
　　缺點(diǎn)：尚存在非特異性染色的問(wèn)題，技術(shù)程序比較復(fù)雜。
　　免疫熒光結(jié)果：
　　抗原存在部位帶有二抗標(biāo)志的熒光。

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