分枝杄菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量脂質(zhì)包圍在肽聚糖的外面所以分枝杄菌般不易著色。傳統(tǒng)的染色方法要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。
抗酸染色液(金胺O熒光法)屬于熒光染色液,無需加熱,相對較抗酸熱染液安全。其染色原理是在室溫條件下 Auramine O染色以及復(fù)染后,用含有紫外光源的熒光顯微鏡檢查,抗酸桿菌呈亮黃色,而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)呈暗黃色,這種方法可用低倍鏡檢,因此能更快速找出抗酸性菌
抗酸染色液操作步驟(僅供參考):
1、接種環(huán)挑取待檢樣本,涂布于載玻片上,加熱固定。
2、滴加金胺O染色液避光染色,水洗。
3、用酸性脫色液脫色,直至涂片無黃色為止,水洗
4、用復(fù)染液染色,水洗
5、輕輕吸干水分,自然干燥。
6、熒光顯微鏡下鏡檢。
抗酸染色液染色結(jié)果
抗酸菌:亮黃色或橘黃色
非抗酸菌、細(xì)胞、背景:暗黃色
注意事項:
1、每次使用后蓋緊試劑瓶,以防試劑揮發(fā)和污染。
2、金胺O熒光易衰減,盡量避光操作。
3、上述試劑均對人體有刺激性,請注意適當(dāng)防護(hù)。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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