適合從植物組織中提取基因組 DNA

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 適合從植物組織中提取基因組 DNA

采用*的疏水膜技術(shù)，*去除植物組織細(xì)胞中蛋白和大部分 RNA 等各種干擾物，提取高純度的DNA。試劑盒采用*的緩沖系統(tǒng)，可從絕大多數(shù)不同類型的植物包括水稻，小麥，玉米，擬南芥和大豆等植物中快速提取基因組 DNA。一般情況下，100 mg 新鮮組織的基因組 DNA 產(chǎn)量可達(dá) 5-30 μg。

樣品處理

2. 組織破碎：可根據(jù)不同樣品研磨難易程度選擇以下方法：1）液氮研磨：將 50-100 mg 組織直接放入研缽，加入少量液氮，迅速研磨，再加少量液氮，再研磨，如此三次，將樣品研成粉末。用藥匙迅速將樣品干粉按 100 mg 組織/1000 μl KBL1 的比例加入一新的 2 ml 離心管中。加入 KBL1 后，震蕩混勻。室溫 13 000 rpm 離心 2 min。

2）直接研磨：對于新鮮植物組織，將 50-100 mg 組織直接放入研缽，按 100 mg 組織/1000 μlKBL1 比例加入 KBL1，直接在 KBL1 中將樣品研磨勻漿后，轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管（推薦）。室溫 13 000 rpm 離心 5 min。棄去沉淀，上清液待轉(zhuǎn)移。

吸附

3. 將上清液轉(zhuǎn)移到平衡過的吸附柱內(nèi)，室溫 13 000 rpm 離心 30 s，使裂解液*流過柱子。棄去收集管中的過濾液，把柱套回收集管中。

注意：1）室溫太低可能造成 KBL1 混濁或沉淀，在 37 ℃溫浴片刻即可。

2）如上清液體積過大，可以分成數(shù)次上柱，每次不要超過 700 μl。

4.（可選）加入 30 μl 濃度為 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上，37 ℃放置 5-10 min。

注意：本試劑盒沒有配備 RNase A 溶液。一般來說，這一步?jīng)]有必要，因為本試劑盒的純化柱對 RNA 沒有吸附能力。如果實驗要求不能殘留微量RNA，可采用這一步處理