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技術(shù)文章

日本乙腦抗體檢測(cè)檢測(cè)試劑盒說明書

閱讀:674          發(fā)布時(shí)間:2019-7-24

日本乙型腦炎病毒抗體檢測(cè)檢測(cè)試劑盒說明書

廣州健侖生物科技有限公司

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【產(chǎn)品名稱】:日本乙型腦炎病毒抗體檢測(cè)檢測(cè)試劑盒

【原理】

    日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是流行性乙型腦炎(簡(jiǎn)稱乙腦)的病原體。乙腦是嚴(yán)重威脅人畜健康的一種急性傳染病,可引起母豬流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn),病死率高。豬感染JEV病毒后,在血清中能檢測(cè)到特異性抗體。因此檢測(cè)特異性豬乙腦抗體,可作為豬場(chǎng)乙腦疫苗的免疫監(jiān)測(cè)及該病輔助檢測(cè)指標(biāo)。

    本試劑盒采用ELISA方法檢測(cè)豬血清中的特異性抗體。本試劑盒靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。

【試劑組成】

1.預(yù)包被板

48T/96T;

 

7. 終止液(6號(hào)液)

1支;

2.酶結(jié)合物(1號(hào)液)

1支;

 

8. 陽(yáng)性對(duì)照品

1支;

3.濃縮洗滌液(2號(hào)液)

1支;

 

9. 陰性對(duì)照品

1支;

4.底物(3號(hào)液)

1支;

 

10.不干膠膜

1/2片;

5.顯色劑(4號(hào)液)

1支;

 

11.自封袋

1個(gè);

6.樣本稀釋液(5號(hào)液)

1支;

 

12.使用說明書

1份;



【操作程序】

1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號(hào)液)按1:10稀釋,如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。

2.樣本稀釋   用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清樣本按1:100稀釋,如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液,混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋,直接加樣。

3.加樣反應(yīng)   每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘后再甩凈,拍干。

4. 加酶反應(yīng)   除空白對(duì)照孔外,每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。

5.顯色反應(yīng)   加底物液(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴,混勻,37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴,終止反應(yīng)(加終止液后,藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色)并判讀結(jié)果。

【結(jié)果判斷】

    陰性對(duì)照呈無色或淺黃色,陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。

    以空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長(zhǎng))讀取吸光度(A值)。待檢孔A值大于陰性對(duì)照A值平均值的2.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對(duì)照A值的平均值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。

【注意事項(xiàng)】

1.試劑盒于2-8℃保存,有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性,要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

6. 37℃孵育時(shí),建議使用水浴箱。如無條件,可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。

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