天然AAV1-AAV9、AAVrh10、AAVDJ衣殼（1E+09-1E+10衣殼）和變性AAV8衣殼（1E+09-1E+10衣帽，在樣品緩沖液中于95°C變性10分鐘）的斑點印跡分析。

在室溫下，用PBST（PBS+0.1%吐溫20）中的5%干乳將硝化纖維膜封閉1小時。將抗AAV8（完整顆粒）小鼠單克隆抗體ADK8在封閉緩沖液（抗體濃度100 ng/ml）中稀釋，并在室溫下孵育1小時。羊抗小鼠IgG-HRP的第二抗體也在封閉緩沖區(qū)（抗體濃度200 ng/ml）中溶解，并在RT下孵育一小時。使用Pierce?ECL Plus Western Blotting Substrate通過化學發(fā)光檢測可見條帶。

用于表征感染的不同階段，對AAV組裝過程的分析非常有用。ADK8與AAV1、AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80、空衣殼和全衣殼特異性反應。識別組裝衣殼的構象表位。預測的結合位點：殘基586-LQQQNT-591（Gurda等人，2012）。該抗體不能用于使用變性條件的免疫印跡。

作為PROGEN在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦PROGEN熱銷產品抗AAV8、ADK8、小鼠單克隆抗體。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

抗AAV8、ADK8、小鼠單克隆抗體：

數(shù)量10 微克

抗體類型 單克隆

宿主 小鼠

亞型 IgG2a kappa

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

應用 斑點印跡、ELISA、ICC/IF、IP、中和試驗

純化 親和色譜

反應性 AAV3, AAV7, AAV8, AAVrh10, AAVrh74, Anc80

無反應性 AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV6, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ

重懸前儲存 直至標示的有效期前，儲存于2-8°C

重懸后儲存 可在2-8°C下儲存長達3個月；長期儲存需分裝于-20°C；避免凍融循環(huán)

用途 僅供研究使用

克隆號 ADK8

免疫原 AAV8衣殼

濃度 用200微升PBS重懸后濃度為50微克/毫升

配方 凍干；用200微升無菌PBS重懸

結合親和力

KD值 (AAV8) = <1.0E-12 M

KD值 (AAVrh10) = <1.0E-12 M

KD值 (AAVrh74) = <1.0E-12 M

同義詞 腺相關病毒8，AAV-8

測試應用 測試稀釋度

免疫細胞化學（ICC）/ 免疫熒光（IF） 依據(jù)檢測而定

斑點印跡 1:100-1:500 (0.1-0.5 微克/毫升；非變性條件)

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 依據(jù)檢測而定

免疫沉淀（IP） 依據(jù)檢測而定

中和試驗 EC50 ~14 微克/毫升（AAV3），~4 微克/毫升（AAV8） - 依據(jù)檢測而定

抗AAV8、ADK8、小鼠單克隆抗體特點：

純化、凍干

小鼠單克隆抗體

適用于斑點印跡、ELISA和中和

與AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80完整顆粒反應

同種型：IgG2aκ

文獻參考：

Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).

Haar, J., Blazevic, D., Strobel, B., Kreuz, S. & Michelfelder, S. MSD-based assays facilitate a rapid and quantitative serostatus profiling for the presence of anti-AAV antibodies. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 25, 360–369 (2022).

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