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L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024/07/30 10:11:25瀏覽次數(shù):1092

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L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。

詳細(xì)介紹

L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)

細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代

細(xì)胞純度:92.2%

細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

細(xì)胞凍存:液氮凍存(*培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)

細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)

細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

L-540 Hodgkin【人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞】培養(yǎng)條件

1640,90%;**胎牛血清,10%

氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%

溫度:37攝氏度

傳代方法

顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時(shí),進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時(shí)候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。在生物安全柜或者超凈臺(tái)中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

傳代密度均勻,有以下幾點(diǎn)比較重要:

1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。我見(jiàn)過(guò)有些剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹,一上來(lái)就加1-2ml胰酶,結(jié)果細(xì)胞團(tuán)大片脫落,雖然有后續(xù)吹打步驟,但我覺(jué)得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。

2.在以上基礎(chǔ)上,我覺(jué)得細(xì)胞吹勻,這步比上述提到的十字移動(dòng)等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管,加入培養(yǎng)液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。

3.此外我覺(jué)得培養(yǎng)液的量可能也會(huì)有講究,如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液,尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿,液體表面有張力,細(xì)胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。

傳代方法:1:3-1:8傳代,每周換液2次。
細(xì)胞簡(jiǎn)稱:COLO 205(COLO205)細(xì)胞
細(xì)胞名稱:COLO 205(COLO205);人結(jié)腸癌細(xì)胞
組織來(lái)源:結(jié)直腸腺癌,腹水轉(zhuǎn)移
規(guī)    格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells
形態(tài)特征:貼壁/懸浮混合;上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁/懸浮混合
培養(yǎng)條件:RPMI-1640+10% FBS
傳代方法:1:3-1:8傳代,每周換液2次。
背景:該細(xì)胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的,該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4-6周,角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
細(xì)胞簡(jiǎn)稱:MRC-5(MRC5)細(xì)胞
細(xì)胞名稱:MRC-5(MRC5);人胚肺細(xì)胞
組織來(lái)源:肺
規(guī)    格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells

L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

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