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細胞培養(yǎng)的基本原理與技術 現(xiàn)代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發(fā)酵工程技術,而這些技術的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關系,特別是在醫(yī)藥領域的發(fā)展,細胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。
杭州仟諾生物科技有限公司 |
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更新時間:2024/07/29 19:23:36瀏覽次數(shù):778
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HCC364腺癌惡性腺瘤細胞
注意事項如下:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 對于貼壁細胞,若細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和本公司技術部溝通交流。
我們?nèi)娜鉃槟?,提供?yōu)質(zhì)產(chǎn)品,保障售后服務,真心把客戶奉為上帝,及時處理客戶訂單,全程跟蹤貨源,采用誠信快遞運輸,認真解答客戶疑問,對客戶售后問題,不拖沓,不推卸責任,認真負責的態(tài)度。
細胞培養(yǎng)的無菌環(huán)境
一、無菌室
無菌室的結(jié)構:一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。
無菌室的消毒和防污染:為保持無菌狀態(tài),經(jīng)常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(1-2小時),每周甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸(2小時)和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。實際工作中,要根據(jù)無菌室建筑材料的差異來選擇合適的消毒方法。
此外,還應注意防止無菌室的污染。造成無菌室污染的可能包括:送入無菌室的風沒有被過濾除菌;進出無菌室時,能使外界空氣直接對流進無菌室的操作間;等。
二、超凈工作臺
工作原理:鼓風機驅(qū)動空氣通過高效過濾器得以凈化,凈化的空氣被徐徐吹過臺面空間而將其中的塵埃、細菌甚至病毒顆粒帶走,使工作區(qū)構成無菌環(huán)境。根據(jù)氣流在超凈工作臺的流動方向不同,可將超凈工作臺分為側(cè)流式、直流式和外流式三種類型。
超凈臺的使用與保養(yǎng):超凈臺的平均風速保持在0.32-0.48米/秒為宜,過大、過小均不利于保持凈化度;使用前開啟超凈臺內(nèi)紫外燈照射10-30分鐘,然后讓超凈臺預工作10-15分鐘,以除去臭氧和使用工作臺面空間呈凈化狀態(tài);使用完畢后,要用70%酒精將臺面和臺內(nèi)四周擦拭干凈,以保證超凈臺無菌。還要定期用福爾馬林熏蒸超凈臺。
第四節(jié) 常用培養(yǎng)器皿及清洗消毒
細胞培養(yǎng)需要大量消耗性物品,如玻璃器皿、金屬器皿、塑料、橡膠制品、布類、紙類等,因此掌握清洗、消毒知識,學會清洗、消毒方法是從事細胞培養(yǎng)工作必須的。
一、清洗 離體條件下,有害物質(zhì)直接同細胞接觸,細胞對任何有害物質(zhì)十分敏感,極少殘留物都可以對細胞產(chǎn)生毒副作用。因此,新的或重新使用的器皿都必須認真清洗,達到不含任何殘留物的要求。
(一)玻璃器皿的清洗 一般經(jīng)過浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四個步驟。
1、浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應立即浸入清水中備刷洗。
2、刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
3、浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應少于六小時,一般過夜或更長。放取器皿要小心。
4、沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。
(二)橡膠制品清洗
新的橡膠制品洗滌方法:0.5mol/L NaOH煮沸15分鐘,流水沖洗,0.5mol/L HCl煮沸15分鐘,流水沖洗,自來水煮沸2次,蒸餾水煮沸20分鐘,50℃烤干備用。
(三)塑料制品的清洗
塑料制品特點:質(zhì)軟、易出現(xiàn)劃痕;耐腐蝕能力強、但不耐熱。
清洗程序:使用器皿后立即用清水清洗,浸于自來水過夜,用紗布或棉簽和50℃清洗液刷洗,流水沖洗,晾干,浸于清潔液15分鐘,流水沖洗(15-20遍),蒸餾水浸洗三次,雙蒸水泡24小時,晾干備用。
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