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關于胎牛血清的7問7答
細胞培養(yǎng)中bibukeshao的就是胎牛血清，關于科研小伙伴們在使用胎牛血清中遇到的問題，小編整理了以下幾點并進行了解答，一起來看看吧。
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Q：血清應如何保存？
未拆封的血清應存放于 -15 ℃至 -20 ℃，避免反復凍融。拆封后的血清應無菌分裝成一次的用量并存放于 -15 ℃至 -20 ℃，2~8 ℃ 溶解后建議盡快使用。
Q：血清的有效期是多久？
大部分血清效期是 5 年，針對每個批次，請通過廠家質檢確定具體效期日期。
Q：血清應如何融解？
取出的血清置于 2~8 ℃ 融化，不時旋轉混勻，充分融解后分裝或使用。
Q：血清中出現(xiàn)絮狀沉淀是何原因？如何處理？
多種原因可能導致絮狀沉淀的形成，最常見的原因之一是融化過程中，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質量。可以 400 g 離心 5 分鐘，取上清，然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是 0.22 um PES 材質的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。
Q：為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀？如何避免？
在 2~8°C 條件下存放，血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀，如血纖蛋白（fibrin），單體時處于溶解狀態(tài)，在凍融過程中會發(fā)生聚集，形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能。可以 400 g 離心 5 分鐘，取上清，然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是 0.22 um PES 材質的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象，建議血清分裝成一次性用量存于 -15° 至 -20 ℃ 冰箱，避免反復凍融和融化后的血清在 2~8 °C 條件下長時間放置。
Q：血清是否需要做滅活處理？
滅活過程中，會導致血清中某些成分被破壞，如氨基酸，維生素，生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時，才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感，需要去除該組分。最常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白，因為補體在機體中參與細胞殺傷，巨噬細胞和淋巴細胞活化，肥大細胞和血小板組胺釋放，平滑肌收縮等過程，所以一般在免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。
Q：如何進行血清滅活處理？
先將血清融化和混勻，熱滅活時請將其置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質的影響，一次滅活的血清體積不宜過大。最好準備同樣的容器裝相等體積的水（與血清相同溫度），滅活時將裝有血清和水的容器同時放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計，加熱過程中不時輕輕旋轉混勻血清，當溫度計顯示達到 56 ℃ 左右，開始計時。56 ℃ 水浴后，建議馬上轉移到冰上降溫。
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