您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
會(huì)員.png)
7
細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素的作用
細(xì)胞培養(yǎng)起來(lái)感覺(jué)會(huì)很簡(jiǎn)單，但是有時(shí)候也會(huì)出現(xiàn)各種不順的問(wèn)題 ，例如：污染，生長(zhǎng)緩慢，變形，死亡率過(guò)高…..，畢竟細(xì)胞是體外培養(yǎng)的，在培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)受到各種外界因素的影響，培養(yǎng)基、血清、孵育溫度、C02濃度等，除此之外還有抗生素……
一般來(lái)說(shuō)細(xì)胞培養(yǎng)是不需要加抗生素，因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)必須要無(wú)菌操作。如果實(shí)驗(yàn)室污染嚴(yán)重，建議*打掃一下，擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射殺菌。然后把細(xì)胞實(shí)驗(yàn)涉及到的試劑都做下空培，包括使用的胰酶，胎牛血清等。如果實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌條件優(yōu)異，細(xì)胞培養(yǎng)可以不加抗生素，因?yàn)榭股氐乃幮胶投拘运椒浅＝咏?。特別是用于細(xì)胞治療的培養(yǎng)。
若當(dāng)心細(xì)胞感染，可以適當(dāng)添加一些抗生素預(yù)防，如果已經(jīng)有污染，建議按照以下方案添加：
１、常用的是青霉素、鏈霉素聯(lián)合抑制細(xì)菌，即所謂的“雙抗”，主要針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌；對(duì)于細(xì)菌的感染也可用慶大或卡那霉素；
２、如果真菌污染嚴(yán)重，可用兩性霉素／制霉菌素控制；
３、若為支原體污染， 可以用sciencell的支原體抑制劑。在培養(yǎng)基中加入新鮮的支原體抑制劑溶液，每3-4天更換一次。一兩周內(nèi)的足以消除污染?？梢杂行У目梢圆闅⒏鞣N原因感染的支原體。
抗生素多加對(duì)細(xì)胞無(wú)益。加抗生素的主要問(wèn)題是操作不慎造成的污染未必能及時(shí)發(fā)現(xiàn)，造成后期較大的損失。
青鏈霉素是廣譜抑菌劑，對(duì)革蘭氏陰性和陽(yáng)性細(xì)菌有抗菌性，青霉素影響細(xì)菌細(xì)胞壁合成的終末步驟，在轉(zhuǎn)肽反應(yīng)步驟一直多肽鏈的延伸；鏈霉素與核糖體的30S亞基單位結(jié)合，阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)的組成。比較常用 。一般用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。
一旦細(xì)胞污染，處理辦法扔掉，查找原因，全面預(yù)防。如果細(xì)胞是經(jīng)過(guò)大量工作或高價(jià)才得到的，扔掉實(shí)在可惜，可以針對(duì)污染源加抗生素。也可以不加抗生素進(jìn)行單克隆有限稀釋至96孔板，再克隆化。
但是污染帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)影響和損失不可估量，主要的是平常都要做好細(xì)胞房的管理和消毒工作。防止污染的發(fā)生。