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細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成,如果生產(chǎn)如何處理!

閱讀:1641        發(fā)布時(shí)間:2019/11/23
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1、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

2、培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。


3、培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2。


4、嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。


5、掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

6、一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁。

7、然后,在鏡下觀察細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。

8、如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。

9、如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):

1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸。


2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果。


3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng)。


4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格,可應(yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn)。


5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。

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