優(yōu)等胎牛血清的使用是有自己的一套方法的
分析關(guān)于優(yōu)等胎牛血清的使用方法:
1、血清必須貯存-20℃,如存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)兩周,對(duì)于某些單位一次無(wú)法用完一瓶,可在無(wú)菌條件下將其40-45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清解凍時(shí)體積會(huì)增加10%,必須預(yù)留此膨脹體積的空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。
2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量,因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫(kù)溶解24小時(shí)→室溫下全溶后再分裝,一般以50 ml無(wú)菌離心管中分裝40-45ml。使用過(guò)程中要特別注意,必須規(guī)則地將血清搖晃均勻,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由-20℃放置至37℃環(huán)境下解凍,因?yàn)闇囟雀淖兲?,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而產(chǎn)生沉淀。
3、優(yōu)等胎牛血清的滅活一般是指56℃,30分鐘水浴加熱已*解凍的血清,加熱過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。此處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分去活化。但是,經(jīng)過(guò)滅活處理的血清會(huì)因而造成沉淀的顯著增多,且會(huì)影響血清的品質(zhì)。所以,有的公司所生的細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理,由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過(guò)濾前進(jìn)行過(guò)滅活處理。
4、在使用血清的時(shí)候,勿將血清留置于37℃太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分會(huì)因而受到破壞,影響血清的品質(zhì)。
5、一般我們?cè)谑褂眠^(guò)程中是先過(guò)濾培養(yǎng)基,再加血清,勿直接過(guò)濾血清。
優(yōu)等胎牛血清由未出生的牛的血制成;新生牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。優(yōu)等胎牛血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。