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ELISA試劑盒標(biāo)本的采取和保存
ELISA試劑盒標(biāo)本的采取和保存
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中或許含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)發(fā)作假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久，其間的可發(fā)作聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng)?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，弄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自收集時(shí)就應(yīng)留意無(wú)菌操作，也可加入恰當(dāng)防腐劑。
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均平等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清自然凝固收縮后即可獲得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可平等使用。血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法收集，應(yīng)留意防止溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本或許會(huì)增加非特異性顯色。