即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的用儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍妥詣?大類,但其作原理基本上都是致的,其核心都是個比色計,即用比色法來行分析。 測定般要求測試液的zui終體積在250μL以下,用般光電比色計無法成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有殊要求。
原理
酶標儀實際上就是臺變相光電比色計或分光光度計,其基本作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同. 圖示是種單通道自動樣的酶標儀作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成束單色光,入塑料微孔中的待測標本.該單色光分被標本吸收,另分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器行數(shù)據(jù)處理和計算,zui后由顯示器和打印機顯示結(jié)果. 微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動樣檢測過程.而另些酶標儀則是采用手移動微孔板行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單.
微孔板是種經(jīng)事包埋用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標儀測定的原理是在定波長下,檢測被測物的吸光值。
隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發(fā)光(Lum)。
酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的意波長,而濾光片型酶標儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取定波長行檢測。
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酶標儀(MicroplateReader)是對酶聯(lián)免疫檢測(EIA)實驗結(jié)果行讀取和分析的業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物行的,反應結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農(nóng)業(yè)、食品和環(huán)境中,別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應用,使得酶標儀在生殖保健域中應用越來越廣泛,同時促了生殖健康水平提。
目前內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目,如:乙肝五項、艾滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法,報出的結(jié)果缺乏的依據(jù)。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對照品的OD值×2.5,通過目測無法判斷標本孔的反應顏色是否過臨界值。肉眼行兩孔之間的顏色可能還行,但孔的顏色是否過另孔顏色的2.5倍就不可能。
內(nèi)多家機構(gòu),如衛(wèi)生臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應使用酶標儀,并提供酶標儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是些實質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、艾滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴謹,由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術病人術前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的療事故糾紛的手段,正逐漸被許多單位所采用。