詳細(xì)介紹
1 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測組織(魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟)、蜂蜜、雞蛋、牛奶樣本中的磺胺類藥物(Sulfonamides,SAs)。
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的磺胺類藥物與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上磺胺類藥物偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的磺胺類藥物含量大于檢測*時檢測線不顯色,結(jié)果為陽性;當(dāng)樣本溶液中磺胺類藥物含量小于檢測*時檢測線顯紫紅色,結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑卡靈敏度:以SM2計20ppb(ng/ml)
對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
本試劑對磺胺類藥物的靈敏度如下:
2.2 樣本檢測下限:以SM2計
組織……………………………5ppb
蜂蜜……………………………20ppb
牛奶……………………………40ppb
3 試劑盒組成
檢測卡…………………………50個/盒
樣本復(fù)溶液……………………30ml
說明書…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 試劑:乙酸乙酯
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
5.2 樣本前處理步驟:
5.2.1 組織樣本
1)稱取4±0.05g去脂肪均質(zhì)組織樣本置50ml離心管中,加入2ml 純凈水,振蕩樣本成糊狀,再加入4ml乙酸乙酯,振蕩5min,室溫4000r/min以上離心5min;
2)移取2ml上層清澈有機相至潔凈玻璃管中,在50-60℃氮氣或空氣吹干;
3)加入0.5ml樣本復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,備用。
樣本稀釋倍數(shù):0.25 檢測下限:5ppb(SM2)
5.2.2 蜂蜜樣本
1)稱取1±0.05g蜂蜜樣本于15ml離心管中,加入1ml 0.5M鹽酸置于37℃環(huán)境中30min;
2)加入2.5ml 0.2M 氫氧化鈉 (將PH值調(diào)至5左右)再加入4ml乙酸乙脂,振蕩5min,4000r/min以上室溫離心10min;
3)取2ml上層液體清澈有機相至潔凈玻璃管中,在50-60℃下氮氣或空氣吹干;
4)加0.5ml樣本復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,備用。
樣本稀釋倍數(shù):1 檢測下限:20ppb(SM2)
5.2.3牛奶樣本
1)取新鮮牛奶樣本用去離子水按1:1稀釋后,混勻備用。
樣本稀釋倍數(shù):2 檢測下限:40ppb(SM2)
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
7 結(jié)果判斷
陰性:在檢測窗內(nèi),檢測線(T)及對照線(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。
陽性:在檢測窗內(nèi),只有對照線(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
失效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
8 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。