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牛羊布病抗體快速檢測卡
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狂犬病抗原檢測卡 |
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一.勻漿
1)從伍中提總RNA、
。.液氮研:結(jié)塊直入乳缽中,入少液氮,迅速研磨,待結(jié)變軟,加少液氮,再研,如此三次,如每五十腮100mg結(jié)入1ml Trizol,轉(zhuǎn)心管以下步行。
卜人.勻漿:以電動勻漿器盡勻漿2min腮。。注意,結(jié),積不能過Trizol積之10%,不會不好勻漿效。
二)自養(yǎng)細胞中提總RNA
。.粘壁養(yǎng)細胞:不須蛋白酶消化,先將養(yǎng)基去,然后直將Trizol預(yù)于養(yǎng)瓶中消、解坼細胞,Trizol積案10cm2 / ml之比例加。
卜人.懸浮養(yǎng)細胞:直心收細胞后以Trizol重懸、解坼,每1ml Trizol可解坼五×106一動植之物或酵母細胞,或一人細菌細胞107×。注意,于入Trizol前不可以諸緩沖液滌細胞,則益mRNA降解之機。別,在解坼酵母或細菌細胞則假勻漿器。
二.相分離
1)勻漿結(jié)入Trizol后,室溫置5min,使其能解坼。意:此時可入真久存七十。。
室溫?。?2000 min丫。,離心五min。取清于一新管。
三)按1ml Trizol入二百µllv枋,以手蕩混勻后室溫置二心三min。注意:禁漩振蕩器,以基因組DNA斷。
四四真。,12000 min丫。,離十五min。謹(jǐn)取上水于一新管。意:慎勿取中界面;若兼提DNA與蛋白質(zhì),則保留重者相存于四真冰箱中,若但取RNA,則棄下者相。
三.RNA澄
1)按1ml Trizol入異丙醇。.五ml,混沌勻,室溫置五腮十min。
四真!),12000 min丫。,離15min。棄上清,RNA湛管底。意:RNA湛于離是非見之,常在離管之緣或底成凝膠狀丸。