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鼻疽菌抗原快速檢測卡
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產(chǎn)品作用:環(huán)境或臨床標(biāo)本中鼻疽菌抗原的快速檢出,也可用于純培養(yǎng)鼻疽菌的鑒定。
我司提供各腸毒素、肉毒毒素、鼻疽菌抗原抗體、布魯氏菌抗原抗體、炭疽桿菌抗原抗體以及鼠疫菌抗原抗體等檢測試劑盒(膠體金法),隨時歡迎您的來電
鼻疽菌抗原快速檢測卡
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
以下是我司出售的部分產(chǎn)品
B型葡萄球菌腸毒素檢測試劑盒(膠體金法) |
A型肉毒毒素檢測試劑盒(膠體金法) |
類鼻疽菌抗體檢測試劑盒(膠體金法) |
類鼻疽菌抗原檢測試劑盒(膠體金法) |
鼻疽菌抗體檢測試劑盒(膠體金法) |
鼻疽菌抗原檢測試劑盒(膠體金法) |
布魯氏菌抗體檢測試劑盒(膠體金法) |
布魯氏菌抗原檢測試劑盒(膠體金法) |
第二次平衡液:50 mM Tris-HCl (pH 8.8),6 M urea,30% glycerol,2% SDS,0.002% bromophenol blue,2.5% idoacetamide。平衡后膠條放置在12.5%單一梯度聚丙烯酰胺凝膠上,用0.5%的瓊脂糖固定,每塊膠30 mA,電極緩沖液保持在12℃進(jìn)行第二向電泳,直到指示劑到達(dá)膠底部。凝膠用0.1%考馬斯亮蘭R-250染色。
電泳后的凝膠掃描保存圖像(300 dpi),ImageMaster 2D Platinum 5.0軟件分析(Amersham Biosciences, Sweden),表觀分子量根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子量來確定。同一處理的二維電泳至少重復(fù)3次,切取差異表達(dá)蛋白進(jìn)行膠內(nèi)酶解和質(zhì)譜分析。
4. 膠內(nèi)酶解
將蛋白質(zhì)斑點從膠上切下后,用50%乙腈和25 mM NH4HCO3脫色,50 mM NH4HCO3處理在40℃下處理1 h,水洗一次,10 mM DTT,60℃還原1 h,還原后真空冷凍抽干,再用40 mM碘乙酰胺處理30 min后水洗抽干,zui后用10 µl 20 ng/µl trypsin (Proteomics grade,Sigma) 37℃下暗處酶切12-16 h。肽段用0.1%三氟乙suan和50%乙腈提取,真空冷凍濃縮至10 µl左右,-80℃保存待用。
5. 質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫檢索
膠內(nèi)酶解后的樣品用ZipTip C18柱脫鹽,終體積約為2 µl。電噴霧離子化四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜測定序列。串聯(lián)質(zhì)譜數(shù)據(jù)經(jīng)MassLynxTM軟件處理后生成peak list文件,以此文件利用MASCOT搜索引擎(www.matrixscience。。com)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫檢索,選擇NCBI non-redundant數(shù)據(jù)庫(Bermann et al., 2000; Wheeler et al., 2004);對于檢索結(jié)果提供一個可信度分值(MOWSE Score),如果實際值大或等于該值則錯誤率小于5%。當(dāng)出現(xiàn)多個大于標(biāo)準(zhǔn)MOWSE Score值的時候,一般選取得分zui大的結(jié)果,同時還參考其匹配的肽段序列覆蓋率(sequence coverage)以及雙向電泳膠上表觀分子量和等電點確定。全部的檢索結(jié)果經(jīng)EST other數(shù)據(jù)庫檢索驗證。