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抗人CD8免疫磁珠抗體
廣州健侖生物科技?有限公司
本司長期供應(yīng)尼古?。商鎸帲z測試劑盒,其主要品牌包括美國NovaBios、廣州健侖、廣州創(chuàng)侖等進(jìn)口產(chǎn)品,國產(chǎn)產(chǎn)品,試劑盒的實(shí)驗(yàn)方法是膠體金方法。
我司還有很多違禁品檢測、激素檢測、疫病類檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測等抗原抗體原料,還有熒光FITC標(biāo)記類抗體、各種可標(biāo)記單抗以及免疫磁珠等等產(chǎn)品以及各種生物原料和質(zhì)控品等,。
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
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【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-3室
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為咗去到高轉(zhuǎn)染效率,喺轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)過程中,要注意以下幾點(diǎn):
1.純化siRNA
喺轉(zhuǎn)染前要確認(rèn)siRNA嘅大小同純度。為得到高純度嘅siRNA,舉薦用玻璃纖維結(jié)合,打或者通過15-20%丙烯酰胺膠除去反應(yīng)中多余嘅核苷酸,細(xì)嘅寡核苷酸,蛋白同鹽離子。注意:化學(xué)合成嘅RNA通常要走膠電泳純化(即PAGE膠純化)。
2.逃過RNA酵素污染
微量嘅RNA酵素將導(dǎo)致siRNA實(shí)驗(yàn)失敗。由于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中RNA酵素遍存在,如皮膚,頭發(fā),所有徒手接觸過嘅爆物品或者露體喺空氣中嘅爆物品等,此保證實(shí)驗(yàn)個個步驟唔受RNA酵素污染好緊要。
3.健康嘅細(xì)胞培養(yǎng)物同嚴(yán)格嚟用確保轉(zhuǎn)染嘅重復(fù)性
通常,健康嘅細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較高。此外,較低嘅傳代數(shù)可以確保次次實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞嘅穩(wěn)定性。為咗優(yōu)化實(shí)驗(yàn),舉薦用五十代以下嘅轉(zhuǎn)染細(xì)胞,否則細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率會隨時(shí)間明顯下降。
4.逃過使用抗生素
Ambion公司舉薦由細(xì)胞種植到轉(zhuǎn)染后72鐘期間呢逃過使用抗生素??股貢沾┩竼?xì)胞中積累毒素。有啲細(xì)胞同轉(zhuǎn)染試劑喺siRNA轉(zhuǎn)染時(shí)需要無血清嘅條件。呢種情況下,可同時(shí)用正常培養(yǎng)基同無血清培養(yǎng)基做對比實(shí)驗(yàn),以得到*轉(zhuǎn)染效果。
5.揀啱嘅轉(zhuǎn)染試劑
針對siRNA制備方法與及靶細(xì)胞類型唔同,揀好嘅轉(zhuǎn)染試劑同優(yōu)化嘅用對siRNA實(shí)驗(yàn)成功至關(guān)重要。
6.通過啱嘅陽性對照優(yōu)化轉(zhuǎn)染同檢測條件
對大多數(shù)細(xì)胞,看家基因系較好嘅陽性對照。將唔同濃度嘅陽性對照嘅siRNA轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞(同樣啱實(shí)驗(yàn)靶siRNA),轉(zhuǎn)染48鐘后統(tǒng)計(jì)對照蛋白或者mRNA相對于未轉(zhuǎn)染細(xì)胞嘅降低水平。過多嘅siRNA將導(dǎo)致細(xì)胞咗毒以至死亡。
高いトランスフェクション効率を達(dá)成するために、トランスフェクション実験過程の中で、以下の點(diǎn)に注意する必要がある:
いち.純化siRNA
トランスフェクションで前に確認(rèn)siRNAの大きさや純度。を高純度のsiRNA、推薦ガラス繊維で結(jié)合して、或いは、15 - 20アクリルアミドガム除去溶離反応で余分なヌクレオチドは、小さなオリゴヌクレオチド、卵白と塩イオン。注意:化學(xué)合成のRNA通常は走ってゴム電気泳動純化(つまりP(guān)AGE膠純化)。
2 .酵素の汚染を避ける
微量のリボヌクレアーゼつながるsiRNA実験が失敗して。実験環(huán)境の中ではRNA酵素が一般的に存在しているため、皮膚、髪、すべての徒手が接觸したものや空気中の物などが暴露されていることなどによって、すべてのステップがRNA酵素の汚染を受けないことが重要です。
3 .健康の細(xì)胞培養(yǎng)物と厳格な操作トランスフェクションの再現(xiàn)性の確保
通常、健康の細(xì)胞トランスフェクション効率が高い。また、低い伝代數(shù)は、実験によって細(xì)胞の安定性を確保することができる。zui適化の実験のために、オススメのごじゅう代以下のトランスフェクション細(xì)胞、さもなくば細(xì)胞トランスフェクション効率が時(shí)間とともに明らかに下がって。
4 .抗生物質(zhì)の使用を避ける
Ambion會社からのおすすめ細(xì)胞に植えトランスフェクションから72時(shí)間間抗生物質(zhì)の使用を避ける??股镔|(zhì)は透けている細(xì)胞の中で毒素を蓄積する。一部の細(xì)胞やリポフェクタミン法でsiRNAトランスフェクションに必要無血清の條件。このような情況の下で、同時(shí)に用正常培地と無血清培地を?qū)澱諏g験を得るzui高のトランスフェクション効果。
ご.を選ぶリポフェクタミン法
siRNAに対して作製方法及び標(biāo)的細(xì)胞のタイプによって、選択の良いリポフェクタミン法とzui適化の操作に実験の成功の重要siRNA。
ろく.適當(dāng)な陽性対照を通じてトランスフェクションと測定條件のzui適化
大多數(shù)の細(xì)胞に対して、家の遺伝子は比較的に良い陽性と対照的である。は異なる濃度の陽性対照のsiRNAに標(biāo)的細(xì)胞(同様に実験標(biāo)的siRNA)、トランスフェクション48時(shí)間後に対し統(tǒng)計(jì)対照卵白またはmRNA未トランスフェクション細(xì)胞の低減レベル。過ぎたsiRNAにつながる細(xì)胞毒性甚だしきに至っては死亡。