詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6786
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Rabbit Anti-human IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml*
pan 14-3-3 14-3-3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
TMEM166 跨膜蛋白166抗體 規(guī)格: 0.2ml*
TTX(5E7) 素單克隆抗體 規(guī)格: 1ml*
BXDC2 BXDC2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PACAP-27/38 苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 規(guī)格: 0.1ml*
IL-17R/IL-17RA/CD217 白介素17受體抗體 規(guī)格: 0.1ml*
PARP3 多苷二磷酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3 規(guī)格: 0.2ml*
BRSK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SAD-B抗體 規(guī)格: 0.2ml*
phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 0.1ml*
Proteasome 20S alpha 7 蛋白酶體PSMα7抗體 規(guī)格: 0.2ml*
SART1 T淋巴細(xì)胞識別的鱗狀細(xì)胞抗原抗體 規(guī)格: 0.2ml*
CDC42 細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml*
CACNA1S 電壓依賴性鈣通道Cav1.1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
MYCBP2 MYC結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml*
致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒BK48
人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA Kit
大腸桿DB3.1種
pFL38
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA Kit
DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)系列(DNA marker,λDNA/HindIII)
pcHis2 B(pcHis2B)
PIPES Lysis Buffer with NP-40,2X
人白喉抗體(DipHtHeRia Ab)ELISA Kit
SCGYEM medium
pEA300
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA Kit
Oligo快速復(fù)液
pRSF-1b(pRSF1b)
Casein Blocking Buffer in TBS(酪蛋白封堵劑)