技術(shù)文章
影響elisa試劑盒報(bào)價(jià)中非特異性顯色的緣由
閱讀:398 發(fā)布時(shí)間:2018-12-4影響elisa試劑盒報(bào)價(jià)中非特異性顯色的緣由許多,如試劑盒特異性、查驗(yàn)標(biāo)本中含酶符號(hào)物的干擾物,操作進(jìn)程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡(jiǎn)明剖析,以便可以經(jīng)過以上方法把非特異顯色降至zui低極限,然后跋涉檢測(cè)的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的試驗(yàn)作用。查驗(yàn)標(biāo)本中富含酶符號(hào)物的干擾物包被物的純度。
在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是直接ELISA中,試劑的特異性取決于運(yùn)用抗原的純度。當(dāng)時(shí)由于技術(shù)條件的綁縛,包被用抗原或的純度不可以抵達(dá)100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可以跋涉純度特異性。當(dāng)時(shí)運(yùn)用的包被抗原一般為組成多肽抗原。 包被的效價(jià)具有高親和力和高特異性的包被抗體,是挑選試劑特異性的重要方面。
外源性干擾物,常常因樣品搜集、貯存、處置不當(dāng)構(gòu)成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解分裂,釋放出血紅素構(gòu)成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可以會(huì)增加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染,菌體中可以富含內(nèi)源性HRP,有國(guó)內(nèi)報(bào)道酶免HAg試劑檢測(cè)溶血標(biāo)本時(shí)可構(gòu)成假陽性。如在冰箱中保管過久,其間的IgG可發(fā)生聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而,血標(biāo)本在搜集處置時(shí)應(yīng)留神,在冰箱中保管不易過久。