詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
嗜肺軍團(tuán)菌核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) | 50T | GOY-M6121 |
解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
P45017A1/Cytochrome P450 17A1 細(xì)胞色素C P450 17A1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
EGF 表皮生因子抗體 0.1ml*
CEP76 中心體蛋白質(zhì)76抗體 規(guī)格: 0.2ml*
CD172a/SIRP Alpha 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PFKFB1 果糖-2,6-二磷酸酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
phospho-IKKi/IKKe(Ser172) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-CASC3(Tyr181) 磷酸化瘤易感候選基因3抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Phospho-Bad(Ser136) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml*
VASP 管擴(kuò)張激磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml*
C9orf153 9號(hào)染色體開放閱讀框153抗體 規(guī)格: 0.2ml*
SPAG5/MAP126/Asin 子相關(guān)抗原5抗體 規(guī)格: 0.1ml*
NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2抗體 規(guī)格: 0.2ml*
CCDC25 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4抗體 規(guī)格: 0.1ml*
SCN1B 鈉離子通道β1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
嗜肺軍團(tuán)菌核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Musk ketone 酮麝香81-14-120mg
Forsythoside B 連翹酯苷B81525-13-520mg
Aactylon 蒼術(shù)酮6989-21-520mg
Metformin Hydrochloride 鹽酸二甲雙胍1115-70-4200mg
Palmitic acid 棕櫚酸-十六烷酸2109620mg
圓形保溫冰盒(?。?/font>0.5-1.5ml個(gè)
10ml親和層析柱 (1.5×8)10ml個(gè)
L-Alanyl-L-glutaMine L-丙氨酰-L-谷氨酰胺5g瓶
Melatonin 褪黑素1g瓶
Mangnesinm Sulfte 鎂七水50g瓶
Solar Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)琥珀酰亞胺酯1 mg支
Erythrosin B 赤蘚紅B5g瓶
Thrombin 凝血酶1000u支
L-Cystine L-胱氨酸25g瓶
通用引物 ITS1 (10uM)250ul支