詳細(xì)介紹
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱:對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
貨號(hào):GOY-M7047
分類(lèi):核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺癌標(biāo)志物ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白酶(MCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人非小細(xì)胞肺癌抗原(LTA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人芳香烴受體(AhR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人芳基酯酶A(ASA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素分解酶(DUB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒柱式血清血漿DNAout(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
pRI 201-ON(pRI201ON)
Bicine Buffer,0.5M,pH8.0
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA Kit
MAB medium
pcDNA3.1/His A(pcDNA3.1HisA)
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA Kit
一管式病毒DNAout(200次)
pOKD4
Del Rio-Hortega 改良小膠質(zhì)細(xì)胞染色法神經(jīng)組織染色試劑盒
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA Kit
1/4MS培養(yǎng)基
pBudCE4.1(60908-1140)y
人血栓素B2(TXB2)ELISA Kit
96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)