ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點(diǎn)多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴。

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。

人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit

人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human NP (Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit

人肝配蛋白A3 (EFNA3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human EFNA3 (Ephrin A3) ELISA Kit

人吡啶酚(PYD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PYD (Pyridinoline) ELISA Kit

人磷脂酶D2(PLD2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit

人吡哆醛激酶(PDXK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human PDXK (Pyridoxal Kinase) ELISA Kit

人丙酮酸脫氫酶β(PDHβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit

人密封蛋白(OCLN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human OCLN (Occludin) ELISA Kit  

人信號(hào)素7A(SEMA7A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit

人質(zhì)膜膜泡關(guān)聯(lián)蛋白 (PLVAP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PLVAP (Plasmalemma Vesicle Associated Protein) ELISA Kit

人間羥腎上腺素(MN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human MN (Metanephrine) ELISA Kit

人胰島素樣生長因子1受體3(IGF1R3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human IGF1R3 (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor 3) ELISA Kit

人羥酰谷胱甘肽水解酶(HAGH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human HAGH (Hydroxyacylglutathione Hydrolase) ELISA Kit

人表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SPJ (Surfactant Associated Protein J) ELISA Kit

AA花生四烯酸ELISA Kit澳洲茄胺;澳州茄胺 CAS  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支; 訂購|咨詢

地榆皂苷I; 苦丁冬青苷H; 苦丁冬青甙 CAS 35286-58-9 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

酪醇; 對(duì)羥基苯; 4-羥基苯 CAS 501-94-0 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

黃芪皂苷II CAS 84676-89-1 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支 訂購|咨詢

刺五加皂苷B CAS 114902-16-8 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

水晶蘭苷; 水晶蘭甙 CAS 5945-50-6 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支 訂購|咨詢

桑皮苷C CAS 102841-43-0 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

綿馬酸ABA CAS 38226-84-5 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

構(gòu)樹堿 CAS 173220-07-0 規(guī)格： HPLC≥98%,5mg/支 訂購|咨詢

白頭翁皂苷E-1 CAS  規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支; 訂購|咨詢

羥基酪醇 CAS  規(guī)格： HPLC≥98%,50mg/支; 訂購|咨詢

苑子苷A CAS 146501-37-3 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支 訂購|咨詢

竹節(jié)香附素A;銀蓮花素A CAS 89412-79-3 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

齊墩果酸;土當(dāng)歸酸 CAS 508-02-1 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。*，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。