mRNA(信使RNA)轉(zhuǎn)染是一種將外源mRNA引入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù),以實(shí)現(xiàn)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)或基因治療的方法。mRNA轉(zhuǎn)染可以繞過基因組中的DNA轉(zhuǎn)錄和核糖體轉(zhuǎn)錄過程,直接將所需的mRNA傳遞到細(xì)胞內(nèi),從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成。
使用mRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)有多種優(yōu)勢(shì):
1)相比于DNA轉(zhuǎn)染,mRNA轉(zhuǎn)染不需要經(jīng)過核轉(zhuǎn)錄和DNA復(fù)制等步驟,可以更快速地實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成;
2)由于mRNA轉(zhuǎn)染不涉及基因組的改變,避免了可能引發(fā)的不良基因突變和免疫應(yīng)答等問題;
3)mRNA轉(zhuǎn)染還具有可調(diào)控性強(qiáng)、轉(zhuǎn)染效率高以及適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。
在實(shí)際應(yīng)用中,mRNA轉(zhuǎn)染被廣泛用于基因治療、疫苗研發(fā)以及細(xì)胞工程等領(lǐng)域。mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)是愛必信推出的專為真核細(xì)胞進(jìn)行mRNA轉(zhuǎn)染開發(fā)的mRNA專用轉(zhuǎn)染試劑,可用于在多種貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞中遞送mRNA。可直接將mRNA從細(xì)胞外傳遞到細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行表達(dá),這避免了轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用的影響以及進(jìn)入細(xì)胞核的限制,可被廣泛應(yīng)用于短期蛋白表達(dá)的相關(guān)研究工作。
產(chǎn)品亮點(diǎn):
? 專用于mRNA轉(zhuǎn)染,可用于多種貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞;
? 在各種常規(guī)細(xì)胞、難轉(zhuǎn)的原代細(xì)胞或干細(xì)胞中均具有較高的轉(zhuǎn)染效率;
? 不受血清影響,轉(zhuǎn)染前后無(wú)需更換培養(yǎng)基;
? 產(chǎn)品性能穩(wěn)定,毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
以24孔板為例:
1)細(xì)胞接種:每孔接種0.5-1.0×105個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)12-24小時(shí),使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到60-70%融合度;
2)mRNA稀釋:將mRNA稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中,終濃度0.1mg/mL;
3)復(fù)合物制備:取2uL的mRNA轉(zhuǎn)染試劑原液加入到8uL Opti-MEM培養(yǎng)基中,取4uL濃度為0.1mg/mL的mRNA加入到6uL Opti-MEM培養(yǎng)基中,兩者等體積混合;
4)室溫靜置10分鐘;
5)無(wú)需等待,每孔20uL復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板中,混勻,37℃培養(yǎng)18-48小時(shí)后檢測(cè)基因表達(dá),無(wú)需更換培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)案例展示:
1、適用范圍廣泛:使用Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)在不同類型細(xì)胞包括293T細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、LX2細(xì)胞、MC38細(xì)胞、LLC細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞中轉(zhuǎn)染EGFP mRNA,處理細(xì)胞24h后利用熒光顯微鏡拍照,發(fā)現(xiàn)Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)在各類細(xì)胞中均取得了較好的轉(zhuǎn)染效果。
圖1 mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)轉(zhuǎn)染EGFP mRNA至各種類型類細(xì)胞
2、轉(zhuǎn)染效率高:使用Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)和不同競(jìng)品mRNA轉(zhuǎn)染試劑在B16F10細(xì)胞中轉(zhuǎn)染EGFP mRNA,處理細(xì)胞24h后,利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)EGFP mRNA的轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明不同比例的Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)轉(zhuǎn)染效率均高于競(jìng)品轉(zhuǎn)染試劑。
圖2 mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)不用轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率對(duì)比結(jié)果
備注:圖例中不同柱子顏色代表轉(zhuǎn)染試劑和mRNA的比例[轉(zhuǎn)染試劑體積(μL):mRNA的質(zhì)量(μg)],縱坐標(biāo)的數(shù)值代表轉(zhuǎn)染效率。
其他產(chǎn)品搭配推薦:
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品特征 |
abs60174 | Cas9 mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60190 | Cas9 nickase mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60176 | EGFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60178 | Fluc mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60180 | mcherry mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60192 | EBFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60193 | ECFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60195 | mBanana mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60196 | mHoneydew mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60197 | mKate mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60198 | mOrange mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60199 | mPlum mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60311 | mtangerine mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60313 | tdTomato mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60314 | YFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60191 | Cre mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60194 | EPO mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60312 | OVA mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60315 | β-gal mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60332 | Endless eGFP mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60333 | Endless Fluc mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60334 | Endless mcherry mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60335 | Endless Cas9 mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60336 | Endless EPO mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
備注:所有線性工具RNA均使用 Cap AG結(jié)構(gòu)共轉(zhuǎn)錄加帽,修飾堿基5種可任選其一(5-Methoxy-UTP,5-Methyl-CTP,N1-Methylpseudo-UTP,N6-Methyl-ATP,Pseudo-UTP。) |
好消息!Absin文獻(xiàn)獎(jiǎng)勵(lì)重磅升級(jí)!
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
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